乙醇酸氧化酶（GO）活性檢測試劑盒說明書
紫外分光光度法
貨號：BC2010
規(guī)格：50T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑二：臨用前加入6 mL蒸餾水溶解，用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。

產(chǎn)品說明：
乙醇酸氧化酶（EC1.1.3.15）是乙醇酸循環(huán)中的一種酶，也是植物光呼吸代謝中的關(guān)鍵酶，催化乙醇酸氧化生成乙醛酸，通過測定乙醇酸氧化酶活性，可以了解植物光合和呼吸代謝的基本方法。
乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸，乙醛酸和*反應(yīng)生成乙醛酸苯腙，在324nm有特征吸收峰。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計、低溫離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、1mL石英比色皿、天平、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項：

1. 測定之前進(jìn)行預(yù)實驗，若吸光值A(chǔ)1>1，請將樣本用提取液進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂屧贉y定，并在計算公式中乘以稀釋倍數(shù)。

2. 色素含量較高的樣本，可在提取酶時加活性炭吸附。

3. 空白管為檢測各試劑組分質(zhì)量的檢測孔，正常情況下，其OD值變化不超過0.02。

實驗實例：

1. 稱取約0.1g三葉草組織，加入1mL提取液，進(jìn)行冰浴勻漿，然后10000g，4℃，離心10min，取上清進(jìn)行檢測，測得ΔA測定管=A2測定-A1測定=0.868-0.773=0.095，ΔA空白管=A2空白-A1空白=0.027-0.013=0.014，ΔA=ΔA測定管-ΔA空白管=0.095-0.014=0.081，按樣本質(zhì)量計算酶活得：

GO酶活（U/g 質(zhì)量）=392.16×ΔA÷W=317.6496 U/g 質(zhì)量。

1. 稱取約0.1g菠菜組織，加入1mL提取液，進(jìn)行冰浴勻漿，然后10000g，4℃，離心10min，取上清稀釋2倍進(jìn)行檢測，測得ΔA測定管=A2測定-A1測定=0.873-0.778=0.095，ΔA空白管=A2空白-A1空白=0.027-0.013=0.014，ΔA=ΔA測定管-ΔA空白管=0.095-0.014=0.081，按樣本質(zhì)量計算酶活得：

GO酶活（U/g 質(zhì)量）=392.16×ΔA÷W×2（稀釋倍數(shù)）=635.2992 U/g 質(zhì)量。
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